这样应该可以了吧 一、实验目的:(1)掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤。(2)了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯化倍数。(3)掌握离心机的使用。二、实验原理: 邻苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2-,生成带色的中间产物,中间物的积累在滞留30~45s后,与时间成线性关系,一般线性时间维持在4min的范围内,中间物在420nm波长处有强烈光吸收。当有SOD存在时,由于它能催化O2-与H+结合生成O2和H2O2,从而阻止了中间产物的积累,因此,通过测定光吸收即可求出SOD的酶活性。三、实验试剂:大蒜、冷丙酮、磷酸缓冲液(PH78,005mol/L)、氯仿-乙醇混合液、邻苯三酚、浓盐酸、天平、石英砂、研钵、冷冻离心机、50mL离心管 8个、紫外-可见分光光度计、250mL三角瓶8个、玻璃棒8根、试剂瓶250mL 3个、500mL 3个、250mL烧杯16个、试管带胶塞80根、移液管各5根四、实验步骤:(1)SOD提取:称取5g大蒜蒜瓣,加入石英砂研磨破碎细胞,加入15mL的PH78 005mol/L的磷酸缓冲液,研磨搅拌20分钟,使SOD充分溶解,6000rpm离心,弃去沉淀,得上清液。(留出1mL备用,准确量取剩余上清液体积,记录)(2)除杂蛋白:提取液加入1/4体积的氯仿-乙醇混合液搅拌10min,6000rpm离心15min去沉淀,得粗酶液。(取1mL粗酶液备用,精确测量剩余粗酶液体积)(3)SOD酶的沉淀分离: 剩余的粗酶液中加入等体积的冷丙酮,搅拌15min,6000rpm离心15min,得到SOD酶沉淀。将沉淀先加2mL磷酸缓冲液,溶解后再加3mL混匀。6000rpm离心15min,取上清得到SOD酶液。取1mL备用,其余量取体积。(4)粗酶液活性测定:提取液、粗酶液、酶液中SOD活力检测,具体步骤如下。加入邻苯三酚后迅速混匀,准确计时4min,加一滴浓盐酸停止反应,420nm测吸光值。试剂/(mL)空白管对照管OD1提取液OD2粗酶液OD2酶液OD2PH83缓冲液33333SOD提取液00010101蒸馏水218171717室温放置20min邻苯三酚002020202(5)溶液中可溶性蛋白含量测定: 分别从1mL备用的提取液、粗酶液、酶液各取03mL按以下倍数稀释,260nm/280nm测定吸光值,按公式计算蛋白质浓度。提取液稀释:50 ×粗酶液稀释:20 ×酶液稀释:10 ×五、实验数据: 提取液粗酶液酶液总体积(ml) 提取液粗酶液酶液260nm吸光度值 280nm吸光度值 公式蛋白质浓度(mg/ml)=(145A280- 074A260) ×稀释倍数蛋白质浓度(mg/ml) 对照管(OD1)提取液(OD2)粗酶液(OD2)酶液(OD2)420nm吸光值 六、实验结果及数据处理:(1)酶活力单位提取液酶活力单位:=2(OD1-OD2)×5/01=粗酶液活力单位:=2(OD1-OD2)×5/01=酶液活力单位:=2(OD1-OD2)×5/01=(2)总活力提取液总活力U=活力单位×总体积=粗酶液总活力=活力单位×总体积=酶液总活力=活力单位×总体积=(3)比活力提取液酶液比活力U/mg=活力单位/蛋白质浓度=粗酶液比活力U/mg=活力单位/蛋白质浓度=酶液比活力U/mg=活力单位/蛋白质浓度=(4)纯化倍数粗酶液纯化倍数=粗酶液比活力/提取液比活力=酶液纯化倍数=酶液比活力/提取液比活力=(5)回收率 粗酶液回收率=粗酶液总活力/提取液总活力=酶液回收率=酶液总活力/提取液总活力=七、实验结果误差分析:(1)研磨和离心大概还不够充分。(2)由于测量仪器的精密度引起的误差。(3)在操作的过程中,加入邻苯三酚后未混合均匀,可能致使化学反应进行得不很充分,这可能是造成实验数据与预期不符的一个原因;(4)在实验过程中,所需化学试剂加入的量不是很准确,这可能是实验数据出现问题的另一个原因;(5)此外,实验本身还很粗糙,酶的提取、分离和纯化都不能十分彻底,还有很多杂蛋白干扰实验。
醋泡大蒜可以做出腊八蒜。是没有毒的。我国传统美食“腊八蒜”制作中会产生绿色素。我国很多家庭有制作“腊八蒜”的传统,在腊月将大蒜去皮、洗净、剥瓣,倒入米醋,封入小坛,除夕时开封,就做成青翠宜人、蒜香可口的“腊八蒜”。“腊八蒜”制作过程不见阳光,产生的绿色并非叶绿素,而是大蒜绿色素。
腊八蒜6大营养功效
1、它酸甜可口,有蒜香又不辣,有解腻祛腥、助消化的作用。
2、还能诱导肝细胞脱毒酶的活性,可以阻断亚硝胺致癌物质的合成,从而预防癌症的发生。
3、腊八蒜的抗氧化活性优于人参,常食能延缓衰老。
4、经常接触铅或有铅中毒倾向的人食用,则能有效地防治铅中毒。
5、另外,腊八蒜还含有一种叫硫化丙烯的辣素,其杀菌能力可以达到青霉素的1/10,对病原菌和寄生虫都有良好的杀灭作用。
6、可以起到预防流感、防止伤口感染、治疗感染性疾病和驱虫的功效。
另外,普通大蒜性温,多食生热,且对局部有刺激,因此阴虚火旺、目口舌有疾者忌食,但是腊八蒜没有这些禁忌。
扩展资料:
腊八蒜的起源
据老人讲,腊八蒜的蒜字,和“算”字同音,这是各家商号要在腊八这天拢账,把这一年的收支算出来,可以看出盈亏,其中包括外欠和外债,都要在这天算清楚,“腊八算”就是这么回事。腊八这天要债的债主子,要到欠他钱的人家送信儿,该准备还钱。北京城有句民谚:“腊八粥、腊八蒜,放账的送信儿,欠债的还钱。”后来有欠人家钱的,用蒜代替“算”字,以示忌讳,回避这个算账的“算”字,其实欠人家的,终究是要还的。
老北京临年关,街巷胡同有卖辣菜的,可没有卖腊八蒜的。这是为什么呢?您想啊,卖腊八蒜得吆喝吧,怎么吆喝?直接喊“腊八蒜来!”(腊八算来)欠债的人听见吆喝心里咯噔一下,怎么街上还有喊着催债呀!再说了,你一个做小买卖的跟谁算哪!人家不跟你算就不错了,所以腊八蒜不能下街吆喝,都是一家一户自己动手泡腊八蒜,自己先给自己算算,这个年怎么过。
参考资料:
理化鉴定法的概念:利用某些物理的、化学的或仪器分析方法,鉴定中药的真实性、纯度和品质忧劣程度的方法,统称为理化鉴定法。
(一)物理常数的测定
包括相对密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、沸点、凝固点、熔点等的测定。这对医学|教育网搜集整理挥发油类、油脂类、树脂类、液体类药(如蜂蜜等)和加工品类(如阿胶等)药材的真实性和纯度的鉴定,具有特别重要的意义。
(二)一般理化鉴别
①化学定性分析
②微量升华
③荧光分析:一般使用的波长是365nm。
④显微化学分析:利用显微和化学的方法,确定中药有效成分在中药组织结构中的部位,称显微化学定位试验。
⑤泡沫指数和溶血指数的测定:主要针对含有皂苷类的中药进行鉴定。
(三)检查
①水分测定。
②灰分测定。
③膨胀度的测定:如南葶苈子和北葶苈子外形不易区分,北葶苈子膨胀度不低于12,南葶苈于膨胀度不低于3,可以区别二者。又如哈蟆油膨胀度不低于55,可与伪品区别。
④酸败度:是指油脂或含油脂的种子类药材,在贮藏医学|教育网搜集整理过程中发生复杂的化学变化,产生游离脂肪酸、过氧化物和低分子醛类、酮类等分解产物,因而出现异臭味,影响药材的感观性质和内在质量。
⑤色度检查:了解在贮藏过程有色杂质的含量,如白术。
⑥有害物质的检查包括内源性与外源性有害物质两类。内源性的有两种(肾毒性的马兜铃酸和肝毒性成分的吡咯西啶);外源性包括有机氯农药残留量、有机磷农药残留量、黄曲霉毒素、重金属、砷盐、二氧化硫。
(四)色谱法
色谱法又称层析法,包括薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、蛋白电泳色谱法等。
(五)分光光度法
包括紫外分光光度法、红外分光光度法、原子吸收分光光度法(医学|教育网搜集整理重金属、有害元素及微量元素)。
200~400nm为紫外光区,400~760nm为可见光区。
(六)色谱、光谱和质谱联用分析法
(七)浸出物测定
对有效成分尚不清楚或尚无精确定量方法的中药,一般可根据已知成分的溶解性质选用水、乙醇或乙醚等溶剂对药材中可溶性物质进行测定,用以控制中药的质量。
通常选用水、一定浓度的乙醇(或甲醇)、乙醚作溶剂,用冷浸法或热浸法做中药的浸出物测定。
(八)含量测定
含量测定的方法很多,既有经典分析方法(容量法、重量法等)又医学|教育网搜集整理有现代仪器分析法(如紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、薄层扫描法、气相色谱法等)。
考生们在复习执业药师书本知识的时候,也要做一做试题哦,本文“2017年执业药师中药学基础试题及参考答案”,跟着执业药师从业资格考试频道来了解一下吧。希望能帮到您!
第五章 炮制品质量要求及贮藏保管
A型题
1一般炮制品的含水量宜控制在C
A2%~5% B3%~7% C7%~13%
D15%~17% E17%以上
2对于有效成分不清楚的炮制品,常用何法判定质量A
A测定浸出物的含量 B测定含水量 C测定灰分
D色泽 E组织鉴别
C型题
3分析鉴别炮制品的真伪采用的方法有C
A组织鉴别 B理化鉴别 C两者都是 D两者都不是
4分析鉴别炮制品的质量采用的方法有C
A组织鉴别 B理化鉴别 C两者都是 D两者都不是
5一般粉碎成颗粒的药物多是C
A不易切制的药物 B医疗上有特殊需要的药物
C两者都是 D两者都不是
6一般粉碎成粉末的药物多是C
A不易切制的药物 B医疗上有特殊需要的药物
C两者都是 D两者都不是
7炮制品的片型厚度应符合()的规定。C
A中国药典 B炮制规范 C两者都是 D两者都不是
8炮制品应遵循的法规是C
A中国药典 B炮制规范 C两者都是 D两者都不是
9评价炮制品质量的可靠方法是测定C
A有毒成分的含量 B有效成分的含量 C两者都是 D两者都不是
10评价炮制品安全性的方法是测定A
A有毒成分的含量 B有效成分的含量 C两者都是 D两者都不是
X型题
11传统的储藏保管方法有ABCD
A清洁养护法 B密封储藏法 C防湿养护法
D对抗同贮法 E气体灭菌法
12属于对抗同贮法的药对有ABCDE
A丹皮和泽泻 B白花蛇和花椒 C蕲蛇与大蒜瓣
D全蝎与花椒 E全蝎与细辛
13炮制品采用的理化鉴别的方法有ABCDE
A显色反应 B沉淀反应 C荧光鉴别
D升华物鉴别 E薄层色谱鉴别
14炮制品的显微鉴别包括AB
A组织鉴别 B粉末鉴别 C荧光鉴别
D形状鉴别 E薄层色谱鉴别
15净度系指炮制品的纯净度,亦即不应夹带ABCDE
A沙土、杂质 B霉烂品 C虫蛀品 D非药用部位 E灰屑